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次亜塩素酸ナトリウムに浸漬したMineral trioxide aggregateはヒト歯根膜幹細胞株の骨芽細胞分化能を低下させる

山下, 梢 YAMASHITA, Kozue ヤマシタ, コズエ 九州大学

2022.03.23

概要

目的:White mineral trioxide aggregate(WMTA)は歯内治療用材料であり、これまでに次亜塩素酸ナトリウム(NaOCl)と接触することで、色調変化を引き起こすことが報告されている。しかしながら、NaOClと接触したWMTAが、その周囲に存在する細胞の硬組織形成能に及ぼす影響は未だ明らかとなっていない。そこで本研究では、NaOClに浸漬したWMTA discの表面構造と、それらがヒト歯根膜幹細胞株(1-17細胞株)の骨芽細胞分化に及ぼす影響について検証することとした。

材料と方法:ProRoot MTA(Dentsply Sirona)を蒸留水(DW)と混和し、直径5mm・高さ2mmの円形型枠に充填後、24時間硬化させWMTAdiscを作製した。WMTA discをDWまたはNaOClに24時間浸漬後、走査型電子顕微鏡(SEM)およびエネルギー分散型X線装置(EDX)を用いてWMTA disc表面の観察を行った。また、Calcium Assay Kitを用いてWMTA discから培地へのカルシウムイオン放出量の測定を行った。さらに、WMTA discを1-17細胞株と共培養し、von Kossa染色および定量的RT-PCR法を用いて、それらの骨芽細胞分化誘導能について評価を行った。

結果と考察:DWに浸漬したdisc(D-WMTA)では色調変化は認められなかったが、NaOlOに浸漬したdisc(Na-WMTA)では茶褐色に色調変化が認められた。SEM-EDXの結果、D-WMTA、Na-WMTAともに、Ca、Si、Al、C及びOを含む構造物が認められたが、Na-WMTAではそれらに加え、NaとClを含む構造物が認められた。Na-WMTAでは、D-WMTAと比較してdisc表面の元素分布におけるCaの割合が減少し、培地中に放出されるカルシウムイオンの量も減少した。D-WMTAを1-17細胞株と共培養した結果、多くの石灰化基質が形成され、骨関連遺伝子の発現も、disc無しで培養を行った1-17細胞株と比較し、有意に上昇した。一方で、Na-WMTAと共培養した1-17細胞株では、わずかに石灰化基質が形成される程度であり、骨関連遺伝子の発現も、D-WMTAと共培養した1-17細胞株と比較し、有意に低下した。本研究結果から、NaOClはWMTA表面の結晶構造及び元素分布を変化させることで、カルシウムイオンの放出量を減少させることが示唆された。加えて、NaOClによるWMTAからのカルシウムイオン放出量の減少が、WMTAのヒト歯根膜幹細胞に対する骨芽細胞分化誘導能を低下させる可能性が示唆された。

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