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大学・研究所にある論文を検索できる 「扁平上皮癌に特異的な糖タンパクCD271の検出」の論文概要。リケラボ論文検索は、全国の大学リポジトリにある学位論文・教授論文を一括検索できる論文検索サービスです。

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扁平上皮癌に特異的な糖タンパクCD271の検出

藤井 慶太郎 東北大学

2022.03.25

概要

癌細胞で高発現するとされるタンパク(上皮成長因子受容体など)は正常細胞でも発現しており、癌でのみ発現するタンパクは極めて少ない。下咽頭扁平上皮癌と肺扁平上皮癌において、CD271(神経成長因子受容体)が癌の悪性度、特に癌幹細胞様の性質を亢進させることが報告されており、またマウスモデルにおいてヒト化抗 CD271 抗体を作成し、抗体治療が可能であることも報告されている。一方で、CD271 は扁平上皮癌だけでなく正常の上皮基底細胞にも発現していることから、診断・治療といった臨床応用を考えると、従来の抗 CD271 抗体では癌特異性の低さが問題となり、より癌特異性の高い抗体の開発が課題である。

一般的に癌細胞では糖鎖形成に変化が見られる。単糖のつながってできた糖鎖が、タンパクに共有結合しているものの総称を糖タンパクというが、CD271 も糖タンパクとして知られている。糖タンパクは細胞の成長に影響を与えるだけでなく、腫瘍による免疫機能の調節も行っているとされている。糖鎖はこのように癌において重要な機能を持つにもかかわらず、がん特異的な糖鎖形成を有するタンパクの報告はわずかである。そこで私は、特異的な糖鎖を持つ CD271 に対する抗体を樹立し、病理標本を用いてこの抗体の染色特異性の解析を行った。

バキュロウィルス-昆虫発現系を用いて糖鎖修飾を受けた CD271 細胞外ドメイン組換タンパクを精製してマウスに免疫し、癌細胞株を用いた ELISA 法によってハイブリドーマをスクリーニングした。その結果、従来の抗 CD271 抗体よりも親和性が高く、S-S 結合(ジスルフィド結合)によって形成される立体構造を持つ CD271 を特異的に認識するクローン G4B1 を樹立した。G4B1 抗体は、糖鎖で修飾された CD271 抗原を用いて作製したものである。G4B1抗体におけるCD271 の認識部位はCRD4(システインリッチドメイン)であり、CRD4 内でその原因となるアミノ酸を調べたところ、153 番目のスレオニン(CD271 T153)に O 型糖鎖とシアル酸修飾をもつ CD271 を特異的に認識していた。本研究は文献を調べる限り、CD271 の糖鎖修飾を含めて認識する抗体として初めての報告である。

病理標本において G4B1 抗体は、食道の正常上皮は認識せずに扁平上皮癌でのみ染色されるという結果であった。すなわち、CD271 T153 における糖鎖修飾が、食道扁平上皮癌の発生により変化していることを示している。また G4B1 抗体は、幹細胞性が高いとされる胎児の食道上皮、バレット食道腺癌などと親和性があり、幹細胞様の細胞に対して特異性があることが示唆された。

結論として、G4B1 抗体は正常な食道上皮と悪性の食道上皮を区別するマーカーとして有用であると考えられる。また、CD271 T153 における異常な糖鎖修飾は、食道の癌化機構に関与している可能性が示唆された。

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参考文献

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