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抗腫瘍エフェクター細胞の誘導におけるNK2Rの役割に関する研究

SHEN, Weidong 北海道大学

2023.06.30

概要

【背景と目的】
近年、免疫チェックポイント阻害やキメラ抗原受容体 T 細胞の養子移入などの
がん免疫治療が確立され、がん患者の予後の改善に貢献しているが、全ての患者さん
に対して有効ではない。一般に、担がん生体内の腫瘍微小環境における抗腫瘍エフェ
クター細胞の持続的な誘導は、より有効ながん免疫治療の実施において重要である。
ニューロキニン受容体 2(NK2R)は、ニューロキニン A(NKA)の G タンパク質共
役型受容体で、NK2R を介した神経ペプチドシグナルは標的細胞の多様な生理機能を
制御している。これまで I 型あるいは II 型 IFN や自然免疫アジュバント LPS や Poly
I:C による刺激が STAT1 依存的にマウス骨髄由来樹状細胞やヒト単球由来樹状細胞
に NK2R を発現誘導することを見出した。また、NK2R アンタゴニストを使用した
NK2R シグナルの遮断は、樹状細胞の抗原提示能や抗原特異的 T 細胞応答を著しく抑
制することを確認した。しかしながら、担がん生体における抗腫瘍エフェクター細胞
の誘導に対する NKA-NK2R シグナル伝達の作用効果は不明である。そこで、本研究
では、抗腫瘍エフェクター細胞の誘導における NK2R の役割について、マウス生体モ
デルおよび in vitro 評価実験にて明らかにすることを目的とした。
【材料と方法】
野生型 C57BL/6 マウスに対して蛍光タンパク質 mCherry を導入したマウス肝が
ん Hepa1-6 細胞株を脾臓内に移植し、肝臓組織で腫瘍を形成させる肝がんモデルを構
築した。Hepa1-6 細胞の移植後における腫瘍形成について、肝臓組織の生体イメージ
ング法および HE 染色により解析した。腫瘍組織における各種免疫細胞の浸潤につい
て、肝臓組織の免疫組織化学染色法およびフローサイトメトリーにより解析した。ま
たマウスから脾臓細胞を回収し、サイトカインの遺伝子発現レベルを検証した。さら
に poly I:C および抗 CD8 抗体を生体内投与し、腫瘍形成に及ぼす効果を検討した。肝
臓組織に浸潤した CD8 陽性 T 細胞について、Granzyme B の細胞内発現レベルについ
てフローサイトメトリーにより、解析・評価した。野生型 C57BL/6 マウスに加え、
STAT1 欠損マウスあるいは NK2R 欠損マウスを使用し、肝がんの腫瘍形成および免
疫細胞の腫瘍内浸潤への影響を比較検討した。
in vitro 評価実験にて、脾臓細胞および脾臓から単離した CD8 陽性 T 細胞に対す
る CD3、CD28 および NKA 刺激による IFN-γ および Granzyme B の産生誘導レベルを
検証した。 ...

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参考文献

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