大腸癌のTumor buddingにおけるTumor-associated macrophagesの役割の解析

概要

〈背景〉大腸癌におけるTumor buddingは、高いリンパ節転移、生存率の悪化などと関連し、予後不良因子として認識されている。一方で、腫瘍周囲に存在するマクロファージ（Mφ）はtumor-associated Mφ（TAM）と呼ばれ、ヒトの悪性腫瘍の増殖に中心的な役割をしている。しかし、Mφの各々のサブタイプがどのようにbuddingに関わり、さらに大腸癌の予後に影響を与えるのかは、まだ明らかになっていない。本研究では、大腸癌の腫瘍辺縁におけるbuddingの存在状況を正確に評価し、その周囲に現れるTAMのサブタイプを網羅的に調べることで、buddingと関わりの深いTAMを同定し、大腸癌の予後との関連を検証した。

〈対象と方法〉山形大学医学部附属病院で切除術を施行した大腸癌患者102例のホルマリン固定・パラフィン包埋組織（formalin-fixed paraffin embedded; FFPE）を使用した。Buddingと各種細胞マーカーを発現しているMφを検出・計測するため、免疫組織化学染色を実施した。

〈結果〉Budding high群（＞20個／200倍視野）はBudding low群（≦20個／200倍視野）と比較して、予後不良であった（全生存期間, P=0.0035）。Budding low群はBudding high群と比較して、M2b(LIGHT+)TAM数（P=0.0113）、Mox・Mhem(HO-1+)TAM数（P=0.0119）、そしてM2d(VEGF+)TAM数（P<0.0001）が有意に多かった。これらのTAM（M2b, M2d, Mox, Mhem）数とbudding数は、負の相関関係にあった（M2b；rs=-0.2248, P=0.0238、M2d；rs=-0.3780, P<0.0001、Mox・Mhem；rs=-0.1745, P=0.0810）。M2b(LIGHT)low群（≦14.2個／200倍視野）はM2b(LIGHT)high群（＞14.2個／200倍視野）と比較して予後不良であった（全生存期間；P=0.0479、無再発生存期間；P=0.0982）。また、Mox・Mhem(HO-1)low群（≦17.0個／200倍視野）はMox・Mhem(HO-1)high群（＞17.0個／200倍視野）と比較して、予後不良な傾向にあった（全生存期間；P=0.0616）。つまり、M2b(LIGHT+)TAM、Mox・Mhem(HO-1+)TAMの数が少ないほど、予後は不良な傾向にあった。全生存期間、無再発生存期間について、Cox比例ハザード回帰分析を用いて多変量解析したところ、StageⅢ・Ⅳのみが独立した予後不良因子であった。

〈考察〉大腸癌において、buddingは予後不良因子であった。そして、budding数とTAM数（M2b, M2d, Mox, Mhem）が負の相関関係にあることを、はじめて明らかにした。また、M2b(LIGHT+)TAM、Mox・Mhem(HO-1+)TAMの数が少ないほど予後は不良な傾向にあることを、はじめて明らかにした。これらのTAMはbuddingに関わる重要な因子と考えられる。今後、これらのTAMの具体的なメカニズムについて、明らかにしていく必要がある。