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図１ 埋植試験に用いたサンプル
図２：ラット背面皮下の試料埋植位置
●：8 週間試料埋植した位置、●：2 週間試料埋植した位置
① － ③ ： CNF4P-1、 CNF30P-1、 CpTi-1 を ラ ン ダ ム に 埋 植
24
↔：１ｃｍ間隔
図３：感作誘導部位および皮内注射部位
□ は 2×４ ｃ ｍ の 範 囲 の 感 作 誘 導 部 位 、a：純 水 と Freund 完 全 ア ジ ュ バ ン ド（ FCA）の
１：１ の 油 中 水 型（ W/O）乳 化 物（ E-FCA）、b：各 試 験 液（ 試 験 液 、陰 性 試 験 液 ）、c：
b の 試 験 液 （ ｂ の 2 倍 濃 度 ） と FCA と の 等 量 乳 化 化 合 物 を 皮 内 注 射 し た 位 置 。
図４．惹起貼付部位
A:CNF4P’-１ あ る い は CNF30P’-1、 B： CNF4P’-2 あ る い は CNF30P’-2、 C:CNF4P’-3
あ る い は CNF4P’-3
D:生 理 食 塩 水 を 貼 付 。
25
図 ５ ． 細 胞 生 存 率 （ ＊ ＊ ｐ <0.01:Tukey test）
図 ６ ． 埋 植 か ら 8 週 間 経 過 し た CNF4P-２ 、 CNF30P-2 お よ び CpTi-2 の 肉 眼 的 所 見
26
図 ７ ． 埋 植 か ら 2 週 間 の 組 織 の 比 較 。 左 の 列 ： 低 倍 率 (a)お よ び 高 倍 率 (d)で の CNF
４ P-2 を 埋 植 し た 組 織 の H&E 染 色 。中 央 列：低 倍 率（ b）お よ び 高 倍 率 (e)で の CNF30P2 を 埋 植 し た 組 織 の H＆ E 染 色 。 右 の 列 ： 低 倍 率 (c)お よ び 高 倍 率 (f)で の CpTi-2 を 埋
植 し た 組 織 の H&E 染 色 。 ス ケ ー ル バ ー ： (a)(b)(c)100 ㎛ 、 (d)(e)(f)50 ㎛ *CNF４ P2、 **CNF30P-2、 ***CpTi-2
27
図 ８ ．埋 植 か ら ８ 週 間 の 組 織 の 比 較 。左 の 列：低 倍 率 (g)お よ び 高 倍 率 (j)で の CNF４ P2 を 埋 植 し た 組 織 の H&E 染 色 。 中 央 列 ： 低 倍 率 （ h） お よ び 高 倍 率 (k)で の CNF30P-2
を 埋 植 し た 組 織 の H＆ E 染 色 。 右 の 列 ： 低 倍 率 (i)お よ び 高 倍 率 (l)で の CpTi-2 を 埋 植
し た 組 織 の H&E 染 色 。 ス ケ ー ル バ ー ： (g)(h)(i)100 ㎛ 、 (j)(k)(l)50 ㎛ *CNF４ P-2、
**CNF30P-2、 ***CpTi-2
図 ９ ． 刺 激 性 試 験 で の 細 胞 生 存 率 （ ＊ ｐ <0.05:Tukey test）
28
図 １ ０ ． CNF48 時 間 吸 水 試 験 結 果 （ ＊ ＊ ｐ <0.01:T-test）
図 １ １ ．MTT 試 験 前 後 の CNF30P-1 お よ び CNF30P-1 の 色 調 比 較 。左 ： MTT 試 験 前
の CNF、 右 ： MTT 試 験 後 の CNF。 上 の 段 ： CNF30P-2、 下 の 段 ： CNF4P-2
表 1． 皮 膚 反 応 の 評 点 付 け (ISO 10993-10, 7 Magnusson and Kligman scale)
視認できる変化なし
非常に軽度なあるいはパッチ状紅斑
中程度で一体化した紅斑
高度紅斑及びあるいは浮腫
29
表 ２ ． CNF4P’-1 に 対 す る 感 作 性 試 験 結 果
感作濃度
100%*４
評価
惹起濃度
観察時間
(hr)*１
陽性率*２
平均評価点*３
100%
24
48
24
48
24
48
24
48
50%
20%
0%
表 ３ ． CNF30P’-1 に 対 す る 感 作 性 試 験 結 果
感作濃度
100%*４
評価
惹起濃度
観察時間
(hr)*１
陽性率*２
平均評価点*３
100%
24
48
24
48
24
48
24
48
50%
20%
0%
表４．生理食塩水に対する感作性試験結果
感作濃度
0%
評価
惹起濃度
観察時間
(hr)*１
陽性率*２
平均評価点*３
100%
24
48
24
48
24
48
24
48
50%
20%
0%
*１ 観察時間は、貼付物除去後24時間と48時間
*２ （陽性動物数/当該群の動物数）×100
*３ 当該群におけるMagnusson and Kligman scaleなどによる反応評価点の総計／動物総数
*４ 抽出物の重量を測定し、投与用媒体に希釈して調製
30
...
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